第三节 药品质量标准分析方法的验证
★《中国药典》从2000年版起收载了“药品质量标准分析方法验证指导原则”。
★验证的目的是证明采用的方法适合检验要求。
★验证的分析项目有：鉴别试验、杂质检查、含量测定、制剂中其他成分的测定以及溶出量的测定(溶出度、释放度)等。
一、分析方法验证的内容有：
准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。
(一)准确度
定义：该法测定结果与真实值或参考值接近的程度。一般用回收率(%)来表示。
(二)精密度
1.定义：同一个均匀样品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度。一般用偏差、标准偏差(SD)和相对标准偏差(RSD)来表示。
RSD越小，测定结果越集中，精密度越好。
例：与相对标准偏差计算有关的量包括
A.测定结果x1
B.测定结果的平均值
C.测定次数n
D.相关系数r
E.回归方程的斜率b
2.精密度好是准确度高的前提，但方法的精密度好，准确度不一定高，只有在消除了系统误差的前提下，精密度好，准确度也高。只有精密度和准确度都高的结果才可靠。
3.精密度三种表示方法：
*重复性 同人、仪器、时间
定义：在相同条件下，由同一个分析人员测定所得结果的精密度。
*中间精密度 同室，但不同时间、不同人员、不同仪器设备测得结果的精密度。考察随机变动因素对精密度影响。
*重现性 在不同实验室由不同分析人员测定结果之间的精密度。
例：下述验证内容属于精密度的有
A.定量限
B.重复性
C.重现性
D.专属性
E.中间精密度
(三)专属性
在其他组分(杂质、降解产物、辅料等)可能存在的情况下，分析方法准确地测出待测组分的特性。
(四)检测限
定义：在规定实验条件下所能检出被测组分的最低浓度或最低量。
①目视法 非仪器分析法：能观察到实验现象的最低浓度
②信噪比法：为仪器分析法：把低浓度样品信号与空白样品信号比较，按信噪比3:1或2:1时的相应浓度或进样量确定检测限。
(五)定量限：样品中被测组分能被定量测定的最低浓度或最低量。其测定结果应具有一定的准确度和精密度。
一般以信噪比10:1时的相应浓度或进样量确定定量限
(六)线性：测试结果和样品中被测组分的浓度(或量)直接呈正比关系的程度。
回归方程 y = a + bx; 相关系数 r
(七)耐用性： 指在测定条件有小的变动时，测定结果不受其影响的承受程度。
二、不同检验项目对效能指标的要求
1.鉴别 仅需检查专属性和耐用性
2.杂质检查
第三章 物理常数测定法
♣ 物理常数的意义：是药物固有的物理特性，其测定结果对药品有鉴别意义;反映药品的纯度。
♣ 物理常数收载在药品质量标准的“性状”项下
♣ 物理常数包括：熔点、相对密度、比旋度、折光率、黏度、吸收系数、凝点、馏程、碘值、皂化值和酸值。
§1 熔点测定法
一、基本概念
(一)熔点 m.p ：按照规定的方法测定，物质由固体熔化成液体的温度、熔融同时分解的温度或在熔化时自初熔至全熔的一段温度。
§初熔：供试品开始局部液化出现明显液滴的温度。
§全熔：供试品全部液化时的温度。
§熔融同时分解：供试品在一定温度下熔融同时分解产生气泡、变色或浑浊等现象。
(二)测定熔点的意义
1. 鉴别药物
2. 反映药物的纯杂程度
二、熔点测定方法
1. 仪器用具
容器(b形管)、搅拌器、温度计(分浸型、0.5℃刻度，须校正)、熔点测定用毛细管(0.9-1.1mm)、加热器、传温液(<80℃ 水;>80℃ 硅油或液状石蜡)
★♣♣2.何种形体的药物可测熔点? 熔点测定方法为?有几种?(Ch.P共收载三法)
§2 旋光度测定法
一、基本概念
1. 某种药物产生旋光性(有光学活性)的原因：含有不对称碳原子
2. 旋光度a：直线偏振光通过含有某些光学活性物质的液体或溶液时，能引起旋光现象，使偏振光的振动平面向左或向右旋转,偏振光旋转的度数为旋光度。“左旋”表示为“-”，右旋表示为“+”。
3. 比旋度[a]：
定义：偏振光透过长1dm，且每1ml中含有旋光性物质1g的溶液，在一定波长与温度下测得的旋光度。
表示方法：[a]D20 钠光谱D线589.3nm作光源，20°C，一般温度调节至20°C ± 0.5 °C;c浓度(1 g/ml);测定管长度l为(1 dm)，测定的比旋度，即表示为 [a]D20
4. 比旋度的计算
三、旋光度测定法的应用范围：
有手性碳原子的药物→旋光性→特定的比旋度→鉴别药物或判断其纯杂程度。
(1)药物鉴别
(2)杂质检查 依据：药物与杂质的旋光性差异
如硫酸阿托品中杂质莨菪碱的检查
§★§例题 硫酸阿托品中杂质左旋莨菪碱的检查方法为：称取本品，按干燥品计算，加水制成每1 ml中含50 mg的溶液，依法测定旋光度，不得过-0.40°，已知控制莨菪碱的限量为24.6%，则莨菪碱的比旋度为：
A. -32.5 °
B. -0.325 °
C. -0.0325 °
D. –19.7 °
E.-1.97 °
解：[a]D20 = a/lc = -0.40°/(1×50×10-3×24.6%)= -32.5°
(3)含量测定
中国药典采用旋光度法测定含量的药物有：葡萄糖注射液、葡萄糖氯化钠注射液、右旋糖酐氯化钠注射液、右旋糖酐葡萄糖注射液。
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